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熟悉荧光显微镜的工作原理

更新时间:2025-04-26点击次数:98

荧光显微镜是一种利用荧光现象进行观察的特殊光学显微镜,在生命科学、医学、材料科学等领域发挥着重要作用。

荧光显微镜利用被称为荧光的自然现象。在荧光显微镜下,通过激发样品内部的某些细胞结构或者分子等,使他们进入到激发态,当它们回到基态时,会释放出可见光区的光,通过放大并检测此荧光来生成图像。因为荧光只从被激发的分子发射出来,所以它可以提供高度选择性的成像能力。

工作原理:

1、激发荧光:使用特定波长的光照射样本,样本中的荧光物质吸收激发光能量后跃迁至高能级状态。

2、发射荧光:处于激发态的荧光物质不稳定,返回基态时发射出波长更长的荧光。

3、滤光成像:通过激发滤光片确保特定波长激发光照射样本,阻挡滤光片仅允许荧光信号到达观察者,配合暗视野背景形成高对比度图像。

荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。

功能:

1、荧光标记观察:对细胞内特定分子进行荧光标记,实时监测其动态变化。

2、高对比度成像:暗视野背景与荧光信号形成强反差,可分辨微弱荧光信号。

3、多模态成像:支持明场、暗场、微分干涉、偏光等多种观测模式切换。 

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